کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق‌العاده چیست و کاربرد و مزایای آن

کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق‌العاده چیست و کاربرد و مزایای آن

کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق‌العاده

سیستم UPLC با استفاده از یک استاندارد خارجی از الیگومرهای گلوکز هیدرولیز شده و نشان‌دار شده با 2-AB (دکستران) کالیبره شده است که از طریق آن زمان‌های ماند گلیکان‌ها به واحدهای گلوکز تبدیل می‌شود.

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) به‌عنوان یکی از رایج‌ترین و غالب‌ترین فناوری‌های مورد استفاده در آزمایشگاه‌های تحلیلی برای تجزیه‌وتحلیل داروها در سراسر جهان طی بیش از ۳۰ سال گذشته ثابت شده است. یکی از نگرانی‌های اساسی برای رشد این تکنیک، مواد بسته‌بندی است که بر جداسازی‌ها تأثیر می‌گذارد. در این مکانیسم جداسازی، معادله ون‌دی‌متر است که هر دانشجوی کروماتوگرافی از نزدیک با آن آشنا است.

H = A + B/v + Cv

معادله فوق یک فرمول تجربی است که رابطه بین سرعت خطی (سرعت جریان) و ارتفاع صفحه (HETP یا بازده ستون) را توصیف می‌کند. و از آنجایی‌که اندازه ذرات یکی از متغیرها است، می‌توان از منحنی Van Deemter برای بررسی عملکرد کروماتوگرافی استفاده کرد. در جایی که A، B و C ثابت هستند و v سرعت خطی، نرخ جریان گاز حامل است.

الف = اختلاط گردابی
B = انتشار محوری
C = انتقال جرم املاح

اصطلاح A مستقل از سرعت است و نشان‌دهنده اختلاط «گردابی» است. زمانی‌که ذرات ستون بسته‌شده کوچک و یکنواخت باشند، کوچک‌ترین است. اصطلاح B نشان‌دهنده انتشار محوری یا تمایل انتشار طبیعی مولکول‌ها است. این اثر در نرخ‌های جریان بالا کاهش می‌یابد و بنابراین این عبارت بر v تقسیم می‌شود. عبارت C به‌دلیل مقاومت جنبشی در برابر تعادل در فرآیند جداسازی است. مقاومت جنبشی تأخیر زمانی است که در حرکت از فاز گاز به فاز ثابت بسته‌بندی و بازگشت مجدد وجود دارد. هرچه جریان گاز بیشتر باشد، یک مولکول روی بسته‌بندی بیشتر از مولکول‌های فاز متحرک عقب می‌ماند. بنابراین این عبارت متناسب با v است.

مقایسه بین UPLC و HPLC

اصول یکسان است اما عملکرد نیست!

اصول UPLC همان اصل HPLC است، تفاوت اساسی در طراحی اندازه ذرات ماده ستون است که کمتر از ۲ میکرومتر است. این تفاوت بزرگ در عملکرد و به حداکثر رساندن مزایای این ستون‌ها ایجاد می‌کند و راه‌حلی قدرتمند، قوی و قابل‌اعتماد ایجاد می‌کند. طراحی آشنای UPLC H-class Quaternary Solvent Manager (QSM) و Sample Manager (SMFTN)، با طراحی سوزن جریانی، انعطاف‌پذیری و قابلیت استفاده HPLC فعلی شما را می‌دهد و درعین‌حال به جداسازی‌های بسیار کارآمدی دست می‌یابد که فقط UPLC می‌تواند ارائه دهد.

۱. با استفاده از دمای بالا که باعث کاهش ویسکوزیته فاز متحرک و درنهایت افزایش سرعت جریان می‌شود، فشار برگشتی به‌طور قابل‌توجهی کاهش می‌یابد.

۲. ویژگی منحصربه‌فرد تجزیه‌وتحلیل UPLC، اسکلت‌های به‌هم پیوسته و مسیرهای جریان به‌هم پیوسته (از طریق منافذ) است که در ستون‌های یکپارچه یافت می‌شود. تکنیک UPLC را از HPLC متفاوت می‌کند. در کروماتوگرام UPLC مشخص شده است که تفکیک و جداسازی بهتری نسبت به HPLC دارد، همراه با انجام آنالیز حساس‌تر، کاهش مصرف حلال و سرعت آنالیز بالاتر.

شیمی ذرات کوچک

ایده‌آل معادله ون‌دیمتر را نمی‌توان بدون ذرات کوچک‌تر از آنچه به‌طور سنتی در HPLC استفاده می‌شود، تکمیل کرد. معادله Van Deemter تحت تأثیر اندازه ذرات است، بنابراین تمرکز دانشمند بر طراحی و توسعه ذرات زیر ۲ میکرومتر یک چالش مهم است و محققان برای مدتی در این زمینه فعال بوده‌اند تا از مزایای آن‌ها استفاده کنند. شکل ۱ Van Deemter را نشان می‌دهد. نمودار، نشان‌دهنده تکامل اندازه ذرات در طول سه دهه گذشته است.

محققین دهه‌های متمادی را در «ال‌سی سریع» مطالعه می‌کنند تا سرعت تجزیه‌وتحلیل‌ها را افزایش دهند. در کشف دارو، «نیاز به سرعت» از انتخاب نمونه‌های بسیار زیادی در آزمایشگاه‌های مختلف و در دسترس بودن ابزار پیچیده‌ای مانند UPLC با آشکارساز به‌عنوان طیف‌سنج جرمی ناشی شده است. از ویژگی‌های منحصربه‌فرد ستون که ستون‌های کوچک‌تر و دبی سریع‌تر (در میان پارامترهای دیگر) است استفاده شده است. در طول آنالیز دمای بالاتر، داشتن مزایای دوگانه کاهش ویسکوزیته و افزایش انتقال جرم با افزایش نفوذپذیری آنالیت‌ها نیز بررسی شده است. بااین‌حال، با استفاده از اندازه‌ها و فشارهای معمولی ذرات، اقدامات محدود به‌زودی انجام می‌شود و باید مصالحه‌هایی انجام شود که وضوح را قربانی زمان می‌کند.

مشخص شد که آنالیز با روش UPLC و روش جداسازی کلاسیک از روش HPLC (کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا) است. در HPLC مزایای زیادی مانند استحکام، سهولت استفاده، گزینش پذیری خوب و حساسیت قابل تنظیم وجود دارد. اما محدودیت اصلی آن عدم کارایی در مقایسه با کروماتوگرافی گازی یا الکتروفورز مویرگی به دلیل ضرایب انتشار پایین در فاز مایع است که شامل انتشار آهسته آنالیت ها در فاز ساکن است. مزیت اصلی در UPLC کارایی بهتر با تجزیه و تحلیل سریع است و این تنها با اندازه ذرات کوچکتر به دست می آید. معادله ون دیمتر نشان می‌دهد که با استفاده از ذرات با اندازه کوچک‌تر، راندمان افزایش می‌یابد، اما این منجر به افزایش سریع فشار برگشتی می‌شود، در حالی که اکثر سیستم‌های HPLC می‌توانند تنها تا 400 بار کار کنند. به همین دلیل است که از ستون های کوتاه پر شده با ذرات حدود 2 میکرومتر با این سیستم ها استفاده می شود، برای تسریع در تجزیه و تحلیل بدون از دست دادن کارایی، ضمن حفظ اتلاف قابل قبول بار برای بهبود راندمان جداسازی HPLC، موارد زیر را می توان انجام داد.

• کار در دماهای بالاتر – با کاهش ویسکوزیته فاز متحرک که به طور قابل توجهی فشار برگشتی را کاهش می دهد، نرخ جریان بالایی را امکان پذیر می کند.
• استفاده از ستون های یکپارچه- شامل ساختار تکیه گاه متخلخل پلیمریزه است که مقاومت جریان کمتری را نسبت به ستون های معمولی پر از ذرات ایجاد می کند.

تجزیه و تحلیل UPLC با دو پارامتر بالا در سه زمینه بهبود می یابد.

1. کروماتوگرام تولید شده با پیک حل شده.
2. تجزیه و تحلیل سریع
3. تحلیل حساس

از ذرات ریز استفاده می کند و باعث صرفه جویی در زمان و کاهش مصرف حلال می شود. روش جدید با حفظ همان روش جداسازی تحلیلی مانند HPLC تفاوت بسیار زیادی ایجاد می کند در حالی که موارد دیگری که به شدت تغییر می کند تجزیه و تحلیل سریع، حساسیت و وضوح بالا است. صنایع داروسازی امروزی به دنبال مسیری جدید برای کاهش هزینه و زمان کمتر برای تولید دارو هستند و در عین حال کیفیت محصولاتشان متضرر نمی‌شود که آزمایشگاه‌های آنالیز همه چیز را حفظ می‌کنند. سرعت اجازه می دهد تا تعداد بیشتری از آنالیزها در مدت زمان کوتاه تری انجام شود و در نتیجه کارایی نمونه و بهره وری آزمایشگاه افزایش می یابد. اینها مزایای آنالیز سریعتر و از این رو کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده است. یک سنجش معمولی برای سیستم UPLC برای دستیابی به توان عملیاتی تجزیه و تحلیل نمونه بالاتر و حساسیت سنجش بهتر منتقل و بهینه‌سازی شد. تجزیه و تحلیل هزینه عملیات و توان عملیاتی نمونه، هزینه UPLC نسبت به HPLC سودمند است.

شیمی ذرات کوچک همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، ذرات کوچکتر نه تنها کارایی را افزایش می دهند، بلکه به موازات آن توانایی کار با سرعت خطی بالاتر بدون از دست دادن کارایی را ایجاد می کنند و هم وضوح و هم سرعت را ارائه می دهند. راندمان پارامتر جداسازی اساسی در پشت UPLC است زیرا بر همان گزینش پذیری و ماندگاری HPLC متکی است. در معادله رزولوشن اساسی (Rs):

Rs = √N/4 (α-1/α) (k/k+1)

وضوح با جذر N متناسب است. اما از آنجایی که N با اندازه ذرات (dp) نسبت معکوس دارد:

N α 1/dp

از آنجایی که اندازه ذرات با ضریب سه کاهش می یابد، مثلاً از 5 متر (مقیاس HPLC) به 1.7 متر (مقیاس UPLC)، N سه برابر افزایش می یابد و قدرت تفکیک با جذر سه یا 1.7 نیوتن نیز افزایش می یابد. نسبت معکوس با مربع عرض قله [20-24].

N α 1 / w²

این نشان می دهد که هرچه قله ها باریک تر باشند، راحت تر از یکدیگر جدا می شوند. همچنین ارتفاع قله با عرض قله نسبت عکس دارد:

H α 1/w

بنابراین با کاهش اندازه ذرات برای افزایش N و متعاقباً Rs، افزایش حساسیت حاصل می شود، زیرا قله های باریک تر قله های بلندتر هستند. پیک های باریک تر همچنین به معنای ظرفیت پیک بیشتر در واحد زمان در جداسازی گرادیان است که برای بسیاری از کاربردها، به عنوان مثال، نقشه های پپتیدی مطلوب است. هنوز معادله دیگری هنگام مهاجرت به سمت ذرات کوچکتر مطرح می شود:

F را انتخاب کنید α 1/dp

این رابطه نیز از طرح ون دیمتر آشکار می شود. با کاهش اندازه ذرات،

جریان بهینه (Fopt). برای رسیدن به حداکثر N افزایش می یابد. اما از آنجایی که فشار برگشتی متناسب با سرعت جریان است، اندازه ذرات کوچکتر به فشارهای عملیاتی بسیار بالاتر و سیستمی که به درستی طراحی شده است تا از افزایش بهره وری استفاده کند، نیاز دارد. سیستمی که هم می تواند به طور قابل اعتماد فشارهای لازم را ارائه دهد و هم می تواند کارایی جداسازی ذرات کوچک را با حجم های کاملاً مدیریت شده حفظ کند. با این حال، زمانی که سرعت تجزیه و تحلیل هدف اصلی باشد، می توان از وضوح و کارایی بالاتر حتی بیشتر استفاده کرد. راندمان با طول ستون و با اندازه ذرات نسبت معکوس دارد.

N α L/dp

بنابراین، ستون را می توان با همان فاکتور اندازه ذرات بدون از دست دادن وضوح کوتاه کرد. با استفاده از سرعت جریان سه برابر بیشتر به دلیل ذرات کوچکتر و کوتاه کردن ستون به اندازه یک سوم (دوباره به دلیل ذرات کوچکتر)، جداسازی در 9/1 زمان با حفظ وضوح کامل می شود. بنابراین اگر سرعت، توان عملیاتی یا ظرفیت نمونه نگران کننده باشد، می توان از تئوری بیشتر برای دستیابی به توان عملیاتی بسیار بالاتر استفاده کرد. اما طراحی و توسعه ذرات زیر 2μm یک چالش مهم است و محققان مدتی است که در این زمینه فعال بوده اند و سعی می کنند از مزایای آنها استفاده کنند. اگرچه ذرات 1.5 میکرومتری غیر متخلخل با راندمان بالا به صورت تجاری در دسترس هستند، اما به دلیل مساحت سطح کم از ظرفیت بارگذاری و نگهداری ضعیف رنج می برند. ذرات مبتنی بر سیلیس استحکام مکانیکی خوبی دارند اما می توانند از معایب متعددی رنج ببرند که شامل محدوده pH محدود و باطله آنالیت های اساسی است. ستون‌های پلیمری می‌توانند بر محدودیت‌های pH غلبه کنند، اما مشکلات خاص خود را از جمله راندمان پایین، ظرفیت بارگذاری محدود و استحکام مکانیکی ضعیف دارند. در سال 2000، واترز XTerra® را معرفی کرد، اولین نسل شیمی هیبریدی که از بهترین‌های دنیای ستون‌های سیلیسی و پلیمری بهره می‌برد. XTerra®، ستون ها از نظر مکانیکی قوی، با راندمان بالا هستند و در محدوده pH گسترده ای کار می کنند. آنها با استفاده از سنتز سل-ژل کلاسیک تولید میشوند که کربن را به شکل گروه های متیل ترکیب می کند.

ابزار دقیق

• الف. تزریق نمونه
• ب. ستون های UPLC
• ج. آشکارسازها

الف. تزریق نمونه

در UPLC، معرفی نمونه حیاتی است. شیرهای تزریق معمولی، چه به صورت خودکار یا دستی، برای کار در فشار شدید طراحی و سخت نشده اند. برای محافظت از ستون در برابر نوسانات شدید فشار، فرآیند تزریق باید نسبتاً بدون پالس باشد و حجم جارو شده دستگاه نیز باید حداقل باشد تا گسترش باند بالقوه کاهش یابد. یک زمان چرخه تزریق سریع برای استفاده کامل از سرعت ارائه شده توسط UPLC مورد نیاز است، که به نوبه خود به ظرفیت نمونه بالایی نیاز دارد. تزریقات با حجم کم با حداقل انتقال نیز برای افزایش حساسیت مورد نیاز است. همچنین روش های تزریق مستقیم برای نمونه های بیولوژیکی وجود دارد.

ب. ستون‌های UPLC

وضوح در یک ستون پر از ذرات 1.7 میکرومتر افزایش می یابد زیرا راندمان بهتر است. جداسازی اجزای یک نمونه نیاز به یک فاز پیوندی دارد که هم ماندگاری و هم گزینش پذیری را فراهم می کند. چهار فاز پیوندی برای جداسازی UPLC موجود است:

(i) ACQUITY UPLCTM BEH C8 (ستونهای آلکیل با زنجیره مستقیم)،

(ii) ACQUITY UPLCTM BEH C18 (ستونهای آلکیل با زنجیره مستقیم)،

(iii) ACQUITY UPLC BEH Shield RP18 (ستون گروه قطبی تعبیه شده) و

(IV) ACQUITY UPLC BEH Phenyl (گروه فنیل متصل به عملکرد سیلیل با یک آلکیل C6)،

ACQUITY UPLC BEH Phenyl (گروه فنیل متصل به عملکرد سیلیل با یک آلکیل C6).

هر شیمی ستون ترکیب متفاوتی از آبگریزی، فعالیت سیلانول، پایداری هیدرولیتیک و برهمکنش شیمیایی با آنالیت ها را ارائه می دهد. ستون‌های ACQUITY UPLC BEH C18 و C8 با ارائه وسیع‌ترین محدوده pH، ستون‌های انتخابی جهانی برای اکثر جداسازی‌های UPLC در نظر گرفته می‌شوند. آنها ترکیبات شیمیایی پیوند لیگاند سه عملکردی را در خود جای می دهند که پایداری با pH پایین بالاتری را ایجاد می کند. این پایداری pH پایین با پایداری pH بالای ذره 1.7μm BEH ترکیب می‌شود تا وسیع‌ترین محدوده عملیاتی pH قابل استفاده را ارائه دهد. ستون های ACQUITYUPLC BEH Shield RP18 برای ارائه گزینش پذیری طراحی شده اند که تکمیل کننده فازهای ACQUITYUPLC BEH C18 و C8 است. ستون‌های فنیل ACQUITY UPLC BEH از یک اتصال C6 آلکیل سه کاربردی بین حلقه فنیل و عملکرد سیلیل استفاده می‌کنند. این لیگاند، همراه با همان فرآیندهای پوشش انتهایی اختصاصی مانند ستون های ACQUITY UPLC BEH C18 و C8، طول عمر ستون های طولانی و شکل اوج عالی را فراهم می کند. این ترکیب منحصر به فرد لیگاند و پوشش انتهایی روی ذره 1.7μm BEH یک بعد جدید در گزینش پذیری ایجاد می کند که امکان تطبیق سریع با ستون HPLC موجود را فراهم می کند. بعد داخلی (ID) ستون 2.1 میلی متر استفاده شده است. برای حداکثر وضوح، طول 100 میلی متر و برای تجزیه و تحلیل سریع تر و توان نمونه بالاتر، ستون 50 میلی متر را انتخاب کنید. عرض اوج نیم ارتفاع کمتر از یک ثانیه با ذرات 1.7μm به دست می آید که چالش های قابل توجهی را برای آشکارساز ایجاد می کند. به منظور ادغام یک پیک آنالیت به طور دقیق و قابل تکرار، نرخ نمونه برداری آشکارساز باید به اندازه کافی بالا باشد تا نقاط داده کافی را در سراسر قله ثبت کند. سلول آشکارساز باید دارای حداقل پراکندگی (حجم) باشد تا کارایی جداسازی حفظ شود. از نظر مفهومی، بسته به تکنیک تشخیص، افزایش حساسیت برای تشخیص UPLC باید 2-3 برابر بیشتر از جداسازی HPLC باشد. تشخیص MS به طور قابل توجهی توسط UPLC افزایش یافته است. افزایش غلظت پیک با کاهش پراکندگی کروماتوگرافی در نرخ‌های جریان پایین‌تر باعث افزایش راندمان یونیزاسیون منبع می‌شود. سیستم ACQUITY UPLC از یک مدیر حلال دوتایی، مدیر نمونه شامل بخاری ستون، آشکارساز و سازمان دهنده نمونه اختیاری تشکیل شده است.

مدیر حلال دودویی از دو پمپ جریان سریال مجزا برای ارائه یک گرادیان باینری موازی استفاده می کند. دریچه های انتخاب حلال داخلی برای انتخاب از بین حداکثر چهار حلال وجود دارد. محدودیت فشار 15000 psi (حدود 1000 بار) برای استفاده کامل از ذرات زیر 2μm وجود دارد. مدیر نمونه همچنین چندین پیشرفت فناوری را در خود جای داده است. با استفاده از معرفی نمونه با کمک فشار، پراکندگی کم از طریق فرآیند تزریق حفظ می‌شود و یک سری مبدل‌های فشار، نظارت و تشخیص خود را تسهیل می‌کنند. از نمونه برداری سوزن در سوزن برای بهبود استحکام استفاده می کند و سنسور کالیبراسیون سوزن دقت را افزایش می دهد. زمان چرخه تزریق 25 ثانیه بدون شستشو و 60 ثانیه با شستشوی دوگانه برای کاهش بیشتر حمل استفاده می شود. انواع فرمت های صفحه میکرو تیتر (چاه عمیق، ارتفاع متوسط یا ویال) نیز می توانند در یک محیط کنترل شده با ترموستاتیک قرار گیرند. با استفاده از سازمان دهنده نمونه اختیاری، مدیر نمونه می تواند تا 22 صفحه میکرو تیتر تزریق کند. مدیر نمونه نیز بخاری ستون را کنترل می کند. دمای ستون تا 65 درجه سانتیگراد قابل دستیابی است. برای به حداقل رساندن پراکندگی نمونه، یک طراحی “pivot out” اجازه می دهد تا خروجی ستون در مجاورت نزدیکتر به ورودی منبع آشکارساز MS قرار گیرد.

مزایای UPLC

مزایای مختلف UPLC به شرح زیر است:

• نیاز به زمان اجرا کمتر و افزایش حساسیت.
• گزینش پذیری، حساسیت و محدوده دینامیکی آنالیز LC را ارائه می دهد.
• در کروماتوگرام پیک های حل شده به دست می آید.
• روش های چند پس مانده اعمال می شود.
• تجزیه و تحلیل سریع، تعیین کمیت دقیق آنالیت ها و محصولات مرتبط.
• استفاده از ذرات ریز (2μm) برای بسته بندی فاز ساکن، آنالیز را سریع می کند.
• زمان و هزینه هر دو کاهش می یابد.
• مصرف حلال ها کمتر است.
• محصولات بیشتر با منابع موجود تجزیه و تحلیل می شوند.

ظرفیت نمونه را افزایش می‌دهد و تولیدکنندگان را قادر می‌سازد تا مواد بیشتری تولید کنند که به طور مداوم مشخصات محصول را برآورده می‌کند یا از آن فراتر می‌رود، به طور بالقوه تنوع، دسته‌های ناموفق یا نیاز به کار مجدد مواد را حذف می‌کند.

تجزیه و تحلیل بلادرنگ را همگام با فرآیندهای تولید ارائه می دهد.

کیفیت محصول نهایی، از جمله آزمایش نسخه نهایی را تضمین می کند.

معایب UPLC

در تجزیه و تحلیل UPLC نقطه ضعف اصلی رخ می دهد عمر ستون، در طول تجزیه و تحلیل فشار بالا به دلیل اندازه ذرات ایجاد می شود. افزایش فشار باعث کاهش عمر ستون ها می شود. به دلیل افزایش فشار نیاز به نگهداری بیشتر و کاهش طول عمر ستون های این نوع می باشد. با استفاده از فاز ثابت ذرات اندازه 2μm تجزیه و تحلیل بهتری را بدون اثرات نامطلوب فشار بالا انجام می دهد.

کاربرد

در صنعت داروسازی تقاضا برای آنالیز UPLC بسیار زیاد است، زیرا ویژگی های منحصر به فرد UPLC مانند وضوح بالا در کروماتوگرام، تجزیه و تحلیل زمان کوتاه که باعث می شود کار تحلیلی بیشتری در زمان کمتر با داده های ارزشمند، قابل اعتماد و معتبر انجام شود. دانشمند می تواند داده های دقیق‌تری را توسط UPLC به روشی سریعتر تولید کند. برای تجزیه و تحلیل محصول گیاهی از تکنیک UPLC استفاده می شود. در آزمایشگاه تحلیلی تقاضای UPLC بسیار زیاد است زیرا روش توسعه یافته دقیق و دقیق است و همچنین اطلاعات تحقیقاتی آنالیت را در سطح نانو گسترش می دهد. با این روش می توان استاندارد تجزیه و تحلیل را از هر نظر اعم از کیفی، کمی و پیچیدگی نمونه در استاندارد بسیار بالا متمایز کرد. سیستم UPLC/MS برای تولید داده ای استفاده می‌شود که پیچیدگی ترکیب را حل می کند. با استفاده از MS به عنوان آشکارساز با UPLC، تفسیر تجزیه و تحلیل به عمق می رود. چنین تحلیلی در زمینه زیست تحلیلی بسیار کاربرد دارد. ویژگی‌های منحصربه‌فرد UPLC که وضوح بالا و تجزیه و تحلیل سریع نیز در مطالعات فارماکوکینتیک مانند جذب، توزیع، متابولیسم و دفع (ADME) بسیار مفید است. مطالعات ADME خواص فیزیکی و شیمیایی ترکیب را اندازه گیری می‌کند. روش UPLC/MS/MS باعث صرفه جویی در زمان می‌شود. برای فرآیند توسعه و فرمولاسیون دارو، پروفایل، شناسایی و کمی سازی مواد دارویی و ناخالصی های آنها می تواند بسیار دقیق انجام شود.

تجزیه و تحلیل UPLC را می توان به صورت زیر انجام داد:

1. تجزیه و تحلیل اسید آمینه.
2. تحلیل طب طبیعی و طب گیاهی.
3. تجزیه و تحلیل داروها در پلاسمای انسان (به عنوان مثال لووفلوکساسین و متابولیت‌ها).